腦利鈉肽（BNP）

抗體參數(shù)

名稱	腦利鈉肽抗體（BNP antibody）
貨號(hào)	K136m1	R195e5
類型	單克隆抗體
反應(yīng)物種	人
應(yīng)用平臺(tái) 推薦配對(duì)	化學(xué)發(fā)光、免疫層析
	R195e5（捕獲）-K136m1（檢測(cè)）
純度	Protein A/G純化，純度>95%
緩沖液	1xPBS，pH 7.4
儲(chǔ)存	-20℃或更低溫度，分裝保存，避免反復(fù)凍融

產(chǎn)品數(shù)據(jù)

化學(xué)發(fā)光平臺(tái)（ALP）

1.雅培樣本符合率

用BNP抗體（R195e5、K136m1）制成的化學(xué)發(fā)光試劑，檢測(cè)55例雅培賦值樣本，樣本符合率（R²）為0.9988。

編號(hào)	樣本濃度（pg/mL）	RLU
1	＜10	8355
2	＜10	9563
3	15.3	21366
?	?	?
54	3750	5689869
55	＞4000	6971339

表1. BNP臨床對(duì)比分析數(shù)據(jù)（雅培賦值）

圖1. BNP臨床對(duì)比分析（雅培賦值）

2.最低檢測(cè)限

用BNP抗體（R195e5、K136m1）制成的化學(xué)發(fā)光試劑，對(duì)零濃度稀釋液重復(fù)測(cè)定20次，計(jì)算最低檢測(cè)限。

名稱	濃度（pg/mL）	RLU平均值	線性方程
校準(zhǔn)品S1	0	4833	y=274x+4833
校準(zhǔn)品S2	5	6203	y=274x+4833
20次重復(fù)測(cè)定零濃度稀釋液RLU值
4766	4836	5122	4879
4933	4988	4820	4566
4803	5103	4766	4968
5108	5269	4822	4875
4998	5169	4923	4888
RLU均值		4930
SD		165.8
平均值+2SD		5262
最低檢測(cè)限（pg/mL）		1.565

表2. BNP化學(xué)發(fā)光試劑最低檢測(cè)限

3.線性

將濃度為5010pg/mL的雅培賦值高濃度樣本，用樣本稀釋液稀釋為40%、20%、10%、2%、0.2%和0.1%六個(gè)濃度。用BNP抗體（R195e5、K136m1）制成的化學(xué)發(fā)光試劑對(duì)高濃度樣本及六個(gè)稀釋樣本進(jìn)行檢測(cè)，計(jì)算相關(guān)性。

百分比	濃度（pg/mL）	RLU	絕對(duì)偏差	相對(duì)偏差
100%	5010	7616661	/	-0.10%
40%	2021	3045882	/	0.70%
20%	1002	1487627	/	-0.10%
10%	492.5	708500	/	-1.80%
2%	101.3	110277	/	0.80%
0.2%	10.18	12850	-0.06	/
0.1%	4.93	6114	-0.07	/
相關(guān)性：0.99999

表3. BNP化學(xué)發(fā)光試劑線性

4.重復(fù)性

利用同一批BNP抗體（R195e5、K136m1）制成的化學(xué)發(fā)光試劑對(duì)濃度為50.28pg/mL和1019pg/mL的雅培賦值樣本各重復(fù)檢測(cè)10次，其測(cè)量濃度變異系數(shù)（CV）均小于2.5%。

低值樣本
編號(hào)	RLU	濃度（pg/mL）
1	65235	51.01
2	63682	49.80
3	65222	51.00
4	64580	50.50
5	65607	51.30
6	66890	52.30
7	66338	51.87
8	62438	48.83
9	63502	49.66
10	67082	52.45
平均值	/	50.87
標(biāo)準(zhǔn)差	/	1.187
CV	2.3%

表4. BNP化學(xué)發(fā)光試劑重復(fù)性（低值）

高值樣本
編號(hào)	RLU	濃度（pg/mL）
1	1492215	1003
2	1462854	985.8
3	1507507	1015
4	1483346	999.2
5	1571733	1048
6	1572866	1048
7	1565617	1053
8	1516682	1021
9	1505978	1014
10	1482275	998.5
平均值	/	1018.55
標(biāo)準(zhǔn)差	/	23.691
CV	2.33%

表5. BNP化學(xué)發(fā)光試劑重復(fù)性（高值）

5.準(zhǔn)確度

將濃度為1001pg/mL的雅培賦值高濃度樣本，按照1：9的體積比加入到濃度為49.23pg/mL的低濃度血清中，配制成濃度為144.41pg/mL的回收樣品，用BNP抗體（R195e5、K136m1）制成的化學(xué)發(fā)光試劑進(jìn)行檢測(cè)，計(jì)算回收率。

待測(cè)物	測(cè)定濃度（pg/mL）	RLU	濃度平均值（pg/mL）
高濃度樣本	1002	1487627	1004.50
	999.5	1483804
	1012	1502919
低濃度血清	50.16	64144	49.57
	49.88	63785
	48.68	62245
回收樣品	144.2	184797	140.77
	137.8	176586
	140.3	179794
回收率	95.72%

表6. BNP化學(xué)發(fā)光試劑回收率

6.熱穩(wěn)定性

將BNP抗體（R195e5、K136m1）制成的化學(xué)發(fā)光試劑組份分別放置于37℃培養(yǎng)箱和4℃冰箱中加速7天，分別測(cè)試高、低值質(zhì)控品，比較其偏差。

低值質(zhì)控品
編號(hào)	RLU		濃度（pg/mL）
編號(hào)	4℃7天	37℃7天	4℃7天	37℃7天
1	62501	60962	48.88	47.68
2	65516	62219	51.23	48.66
3	63798	60936	49.89	47.66
偏差	4.2%

表7. BNP化學(xué)發(fā)光試劑熱穩(wěn)定性（低值）

高值質(zhì)控品
編號(hào)	RLU		濃度（pg/mL）
編號(hào)	4℃7天	37℃7天	4℃7天	37℃7天
1	1492215	1451232	1005	978.2
2	1502919	1436552	1012	968.6
3	1487627	1439458	1002	970.5
偏差	3.6%

表8. BNP化學(xué)發(fā)光試劑熱穩(wěn)定性（高值）

試用申請(qǐng)

填寫試用申請(qǐng)

BNP臨床診斷意義

腦鈉肽（BNP）又稱B型利鈉肽，由32個(gè)氨基酸組成，是哺乳動(dòng)物心肌細(xì)胞的主要利鈉肽之一。BNP的最初翻譯產(chǎn)物為前BNP原（preproBNP），含134個(gè)氨基酸；切除信號(hào)肽后形成含108個(gè)氨基酸的BNP前體（proBNP），并儲(chǔ)存于心肌分泌顆粒中。當(dāng)心肌細(xì)胞在跨壁應(yīng)激增加時(shí)，proBNP釋放并裂解成有活性的BNP和無活性的N端腦鈉肽前體（NT-proBNP）。BNP最終與鈉肽C受體（NPR-C）結(jié)合，繼而被胞吞和溶酶體降解。

腦鈉肽（BNP）與心功能不全、心肌缺血

BNP濃度在心功能紊亂時(shí)，隨著心室壓力的增大而顯著升高；心衰患者接受治療12小時(shí)之后，BNP濃度顯著下降。因此BNP可作為心力衰竭和心肌梗死預(yù)后的一個(gè)獨(dú)立預(yù)測(cè)因子，動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)心衰患者的治療效果，是急診室心衰診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”。

BNP參考值（依據(jù)2008ESC心衰指南）：

BNP< 100pg/ml	基本排除心衰，其陰性預(yù)測(cè)準(zhǔn)確性高達(dá)97.7%
100pg/ml< BNP< 400pg/ml	不確診
BNP >400pg/ml	心衰可能

腦鈉肽（BNP）與急性缺血損傷

心肌缺血可觸發(fā)許多內(nèi)源性細(xì)胞保護(hù)因子如BNP的釋放。在急性心肌梗死的大鼠心臟模型中，外源性給予BNP，可以以濃度依賴性的方式限制梗死面積，這是一種獨(dú)立于肽的內(nèi)分泌的細(xì)胞保護(hù)作用。BNP的這種急性保護(hù)作用機(jī)制似乎與第二信使三磷酸鳥苷轉(zhuǎn)化為環(huán)磷酸鳥苷（cGMP）的增加有關(guān)，并涉及線粒體ATP敏感性鉀（K_ATP）通道的開放。許多內(nèi)源性保護(hù)介質(zhì)被認(rèn)為是作用于G蛋白偶聯(lián)受體，通過線粒體K_ATP通道開放產(chǎn)生抗缺血作用的。在一些心臟疾病狀態(tài)下， G蛋白偶聯(lián)受體反應(yīng)可能下調(diào)；此時(shí)BNP采用了新的分子信號(hào)途徑，BNP/NPR-A誘導(dǎo)cGMP升高并激活cGMP依賴性蛋白激酶-I（cGK-I），通過cGMP/cGK-I途徑開放K_ATP通道。因此BNP/NPR-A信號(hào)通路可以作為一種非常有效的儲(chǔ)備救助途徑，保護(hù)和挽救組織。

腦鈉肽（BNP）與心肌梗死后重塑

心肌梗死后心肌BNP表達(dá)的持續(xù)升高，影響組織重塑，這個(gè)可能與BNP抑制成纖維細(xì)胞活性和心肌細(xì)胞肥大作用有關(guān)。研究表明，梗死后BNP和心鈉素（ANP）對(duì)心肌成纖維細(xì)胞有明顯作用。這兩種肽都抑制體外缺氧時(shí)心臟成纖維細(xì)胞的膠原合成，并抑制血管緊張素Ⅱ刺激時(shí)的成纖維細(xì)胞增殖。在bnp基因缺失的小鼠中發(fā)現(xiàn)了多灶性心臟纖維化。NPR-A-/-敲除小鼠也會(huì)出現(xiàn)高血壓，并伴有過度表達(dá)心肌肥大和纖維化。

綜上所述，腦鈉肽（BNP）是一種多效性肽，其對(duì)無癥狀左室功能不全、心力衰竭、急性缺血和心肌梗死等心臟疾病具有重要的臨床診斷和治療意義。

參考文獻(xiàn)

[1] Weber M, Hamm C. Role of B-type natriuretic peptide (BNP) and NT-proBNP in clinical routine[J]. Heart, 2006, 92(6):843.
[2] 任節(jié), 段寶祥, 毛建華等. 腦鈉肽與心力衰竭[J]. 中國心血管雜志, 2005.
[3] 楊之, 陳宇, 李強(qiáng)等. 心鈉肽、腦鈉肽臨床研究進(jìn)展[J]. 吉林醫(yī)學(xué), 2010, 31(13):1912-1915.
[4] O Nakagawa，Y Ogawa，H Itoh, et al. Rapid transcriptional activation and early mRNA turnover of brain natriuretic peptide in cardiocyte hypertrophy. Evidence for brain natriuretic peptide as an "emergency" cardiac hormone against ventricular overload[J]. J. Clin. Invest.,1995,96:1280-1287.
[5] Redfield M M, Rodeheffer R J, Steven J Jacobsen MD, et al. Plasma brain natriuretic peptide concentration: impact of age and gender.[J]. Journal of the American College of Cardiology, 2002, 40( 5):976-982.
[6] S, P, D’Souza, et al. B Type natriuretic peptide: a good omen in myocardial ischaemia?[J]. Heart Official Journal of the British Cardiac Society, 2003:707-709.